Kitanda cha DNA cha Udongo wa TIANamp

A-1 Mkusanyiko mdogo wa seli au virusi kwenye sampuli ya kuanzia -Eta utajiri wa seli au virusi.

A-2 Lysis haitoshi ya sampuli -Sampuli hazijachanganywa kabisa na bafa ya lysis. Inapendekezwa kuchanganywa na pulse-vortexing kwa mara 1-2. -Lisisi ya kutosha ya seli inayosababishwa na kupungua kwa shughuli ya proteinase K. —Utoshelevu wa seli au uharibifu wa protini kwa sababu ya muda wa kutosha wa kuoga. Inashauriwa kukata tishu vipande vidogo na kuongeza muda wa kuoga ili kuondoa mabaki yote kwenye lysate.

A-3 Matangazo ya kutosha ya DNA. -Hakuna ethanoli au asilimia ndogo badala ya 100% ya ethanoli iliyoongezwa kabla ya lysate kuhamishiwa kwenye safu ya spin.

A-4 Thamani ya pH ya bafa ya upunguzaji ni ya chini sana. -Badilisha pH iwe kati ya 8.0-8.3.

Ethanoli iliyobaki kwenye enzi.

- Kuna mabaki ya kuosha bafa PW kwenye mwangaza. Ethanoli inaweza kuondolewa kwa kuweka centrifuging safu ya spin kwa dakika 3-5, na kisha kuweka kwenye joto la kawaida au incubator 50 for kwa dakika 1-2.

A-1 Sampuli sio safi. -Chukua sampuli chanya ya DNA kama udhibiti ili kubaini ikiwa DNA kwenye sampuli imeharibika.

A-2 Matibabu isiyofaa ya mapema. -Inasababishwa na usagaji mwingi wa nitrojeni kioevu, kurudisha unyevu, au kiasi kikubwa sana cha sampuli.

Matibabu ya mapema yanapaswa kutofautiana kwa sampuli tofauti. Kwa sampuli za mimea, hakikisha kusaga kabisa kwenye nitrojeni ya kioevu. Kwa sampuli za wanyama, homogenate au saga kabisa katika nitrojeni ya kioevu. Kwa sampuli zilizo na kuta za seli ambazo ni ngumu kuvunjika, kama bakteria ya G + na chachu, inashauriwa kutumia njia za lysozyme, lyticase au mitambo kuvunja kuta za seli.

4992201/4992202 Panda Genomic DNA Kit inachukua njia ya msingi wa safu ambayo inahitaji klorofomu kwa uchimbaji. Inafaa haswa kwa sampuli anuwai za mmea, na vile vile poda kavu ya mmea. Hi-DNAsecure Plant Kit pia ni msingi wa safu, lakini bila hitaji la uchimbaji wa phenol / klorofomu, kuifanya iwe salama na isiyo na sumu. Inafaa kwa mimea iliyo na polysaccharides nyingi na yaliyomo kwenye polyphenol. 4992709/4992710 Mfumo wa mmea wa DNAquick unachukua njia inayotegemea kioevu. Uchimbaji wa Phenol / klorofomu hauhitajiki pia. Utaratibu wa utakaso ni rahisi na wa haraka bila kikomo kwa kiwango cha sampuli ya kuanza, kwa hivyo watumiaji wanaweza kurekebisha kiwango kwa urahisi kulingana na mahitaji ya majaribio. Ukubwa mkubwa wa vipande vya gDNA vinaweza kupatikana na mavuno mengi.

DNA ya genomic ilitolewa kutoka kwa viwango tofauti vya sampuli za damu nzima na TIANamp Damu ya Kitamu cha Damu. Matokeo ni kama ifuatavyo. Matokeo yameorodheshwa kama kumbukumbu tu, matokeo halisi ya uchimbaji hutegemea hali ya sampuli.

Uchimbaji wa damu ya damu ya damu inaweza kufanywa kwa kutumia vitendanishi vilivyotolewa katika vifaa hivi viwili kwa kubadilisha tu itifaki kwa maagizo maalum ya uchimbaji wa damu ya damu ya damu. Nakala laini ya itifaki ya uchimbaji wa damu ya damu inaweza kutolewa kwa kuomba.

Simamisha sampuli mpya na 1 ml PBS, chumvi ya kawaida au bafa ya TE. Kabisa homogenize sampuli na homogenizer na kukusanya precipitate chini ya bomba kwa centrifuging. Tupa supernatant, na uongeze tena precipitate na 200 μl bafa GA. Utakaso ufuatao wa DNA unaweza kufanywa kulingana na maagizo.

Kwa utakaso wa gDNA katika sampuli ya plasma, serum na maji ya mwili, TIANamp Micro DNA Kit inapendekezwa. Kwa utakaso wa gDNA ya virusi kutoka kwa sampuli za seramu / plasma, TIANamp Virus DNA / RNA Kit inapendekezwa. Kwa utakaso wa gDNA ya bakteria kutoka kwa sampuli za seli na plasma, TIANamp Bacteria DNA Kit inapendekezwa (lysozyme inapaswa kujumuishwa kwa bakteria mzuri). Kwa sampuli za mate, Hi-Swab DNA Kit na TIANamp Bacteria DNA Kit inapendekezwa.

Kitanda cha mmea wa usalama wa DNA au Mfumo wa mmea wa DNAquick unapendekezwa kwa uchimbaji wa genome ya kuvu. Kwa uchimbaji wa genome ya chachu, TIANamp Chachu ya DNA Kit inashauriwa (lyticase inapaswa kujitayarisha).